LLC-PK1细胞中LDHB蛋白的体外表达及小RNA干扰 |
投稿时间:2019-09-07 点此下载全文 |
引用本文:罗依然,周书亭,杨亮,刘源平,蒋升瑶,叶力波利·达吾力,王子泓,罗渝宵,邹霭萱,崔立,杨志彪.LLC-PK1细胞中LDHB蛋白的体外表达及小RNA干扰[J].《上海交通大学学报》(农业科学版),2019,(6):87-93 |
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作者 | 单位 | E-mail | 罗依然 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | 332187944@qq.com | 周书亭 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 杨亮 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 刘源平 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 蒋升瑶 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 叶力波利·达吾力 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 王子泓 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 罗渝宵 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 邹霭萱 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 崔立 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | | 杨志彪 | 上海交通大学 农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240 | |
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基金项目:国家重点研发计划(2016YFD0500100);上海市科技兴农项目[沪农科推字(2017)第1-11号];国家自然科学基金(31472211) |
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中文摘要:为了观察与猪流行性腹泻病毒(PEDV) NSP12互作蛋白乳酸脱氢酶B (LDHB)的体外表达情况和小RNA干扰效果,构建了真核表达载体pcDNA4.0-LDHB-3*Flag,并在Vero细胞中过表达LDHB,发现在37 kDa处有大小相符的明显条带。设计的2条小干扰RNA能降低LLC-PK1细胞中LDHB的mRNA和蛋白质水平,经one-way ANOVA检验证明干扰实验组2-ΔΔct的平均值显著低于对照组(P<0.05)。该结果为研究LDHB在PEDV感染LLC-PK1和Vero细胞过程中的作用提供了基础数据。 |
中文关键词:LDHB 真核表达 小RNA干扰 |
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In vitro expression of LDHB in LLC-PK1 cells and its sRNA interfering |
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Abstract:In order to observe the in-vitro expression of LDHB interacting with PEDV NSP12 and the efficiency of the small interfering RNA,a eukaryotic expression vector named pcDNA4.0-LDHB-3*Flag was constructed to over-express LDHB in Vero cells,and a matching protein band was detected at 37kDa.The mRNA and protein levels of LDHB were significantly down-regulated in LLC-PK1 cells after interfered by two small RNAs.One-way ANOVA test showed the mean of 2-ΔΔct of experiment groups was substantially below the control groups (P<0.05).This result provided a basis for the functional analysis of LDHB in the process of PEDV infecting LLC-PK1 and Vero cells. |
keywords:LDHB eukaryotic expression small interfering RNA |
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